Как правильно считать лейкоциты в камере горяева. Взятие крови и подсчет эритроцитов и лейкоцитов в счетной камере. Лейкоцито и его виды. Лейкопения

Для работы необходим ы: скарификаторы, ватные шарики, спирт, эфир, счетная камера Горяева, смеситель (меланжер) для подсчета лейкоцитов, 5% раствор уксусной кислоты, подкрашенный метиленовым синим, микроскоп. Объект исследования – человек.

Проведение работы : Счетную камеру помещают под микроскопом и рассматривают сетку Горяева вначале при малом, а затем при большом увеличении. Накрывают камеру покровным стеклом, притирая его края к стеклу камеры до появления радужных колец Ньютона. Оставив камеру под микроскопом, прокалывают палец ранее описанным методом. Первую выступившую каплю крови из пальца стирают ватным тампоном. Во вторую каплю погружают кончик смесителя для лейкоцито, держат его вертикально и набирают кровь до отметки 1, следя, чтобы в капилляр не попали пузырьки воздуха. Обтирают конец капилляра фильтровальной бумагой и быстро, пока кровь не свернулась, переносят его в чашку с 5% раствором уксусной кислоты, продолжая держать смеситель вертикально. Набирают раствор до метки 11 (т.е. разводят кровь в 10 раз), после чего смеситель переводят в горизонтальное положение и кладут на стол.

Для подсчета лейкоцитов берут заполненный меланжер, зажимая нижний конец пальцем, снимают резиновую грушу и, зажав оба конца смесителя третьим и первым пальцами, в течение 1 мин перемешивают кровь. При этом эритроциты разрушаются и в поле зрения остаются только лейкоциты, точнее их ядра. Т.к. уксусная кислота подкрашена метиденовым синим, ядра лейкоцитов становятся видны отчетливее. Выпускают из смесителя на вату три капли, а четвертую наносят на среднюю площадку камеры у края покровного стекла. Капиллярными силами капля сама втягивается в покровное стекло и заполняет камеру. Излишек раствора крови стекает в желобок. Если на сетку попал воздух или на боковых площадках оказался излишек раствора, камеру следует промыть дистиллированной водой, высушить и заполнить снова. Заполненную камеру ставят под микроскоп и, если форменные элементы расположены равномерно (что является показателем хорошего перемешивания крови), приступают к подсчету. Подсчитывают число лейкоцитов в 25 больших квадратах (разделенных на 400 маленьких). Подсчет ведут в пределах маленького квадрата по рядам (от верхнего до нижнего). Во избежание двукратного подсчета клеток, лежащих на границе между малыми квадратами, применяют правило Егорова: « к данному квадрату относятся эритроциты, лежащие как внутри квадрата, так и на его левой и верхней границах; эритроциты, лежащие на правой и нижней границах, к данному квадрату не относятся». Подсчитав сумму лейкоцитов в 25 больших квадратах (что составляет 400 маленьких), находят среднее арифметическое число лейкоцитов в одном маленьком квадрате. Зная, что объем пространства камеры над одним маленьким квадратом равен 1/4000 мм 3 , умножают найденное число на 4000. Получают число лейкоцитов в 1 мм 3 разведенной крови. Умножив на величину разведения (10), получают количество лейкоцитов в 1 мм 3 цельной крови. Таким образом, формула для вычисления количества лейкоцитов следующая: Х = (Л х 4000 х 10)/400, где х – искомое числолейкоцитов в 1мм 3 цельной крови, Л – сумма лейкоцитов в 400 маленьких квадратах, 400 – число маленьких квадратов, в которых произведен подсчет, 10- разбавление крови. Затем полученное число лейкоцитов записывают в пересчете на 1 л крови, т.е. число тысяч лейкоцитов, найденных в 1 мм 3 , умножают на 10 9 .

Оформление результатов и их оценка: Записать, сколько лейкоцитов содержится в 1 л исследуемой крови. Сравнить полученные результаты с нормой. У взрослых этот показатель составляет 6-8 тыс в 1мм 3 или (6,0 - 9,0) х10 9 .

Конец работы -

Эта тема принадлежит разделу:

Учебно-методические материалы по II модулю

Одесский национальный медицинский университет.. кафедра физиологии.. учебно методические материалы..

Если Вам нужно дополнительный материал на эту тему, или Вы не нашли то, что искали, рекомендуем воспользоваться поиском по нашей базе работ:

Что будем делать с полученным материалом:

Если этот материал оказался полезным ля Вас, Вы можете сохранить его на свою страничку в социальных сетях:

Все темы данного раздела:

Система крови
Конкретные цели: 1. Знать состав и функции системы крови, механизмы ее регуляции на основе анализа параметров гомеостаза (объема крови, кислотно-основного равновесия, осмо

Общая характеристика системы крови. Исследование функций и Физико-химических свойств крови
Мотивационная характеристика темы.Знание состава крови и механизма поддержания ее основных констант необходимо ля понимания роли крови как внутреннй среды организма, обеспечивающей

Методика получения крови для анализа у человека
Для работы необходимы: скарификаторы, ватные шарики, спирт, эфир. Объект исследования–человек. Проведение работы: Для получения не

Методика определения объемного соотношения форменных элементов и плазмы (гематокрита)
Для работы необходимы: скарификаторы, ватные шарики, спирт, эфир, 4% раствор цитрата натрия, центрифуга, стеклянные градуированные капилляры. Объект исследования–

Методика определения наличия и количества белка в плазме крови
Для работы необходимы: плазма крови, 4% раствор цитрата натрия, рефрактометр, дистиллированная вода, таблица Рейса. Объект исследования–человек.

Методика исследования буферных свойств сыворотки крови по Фриденталю
Для работы необходимы: образцы сыворотки крови, разведенные в 10 раз; дистиллированная вода; 0,1н раствор НCl; 0,01 н раствор КОН; индикаторы - фенолфталеин, метилоранж; 4 мерных с

Методика приготовления мазка крови и изучение его под микроскопом
Для работы необходимы: скарификаторы, ватные шарики, спирт, эфир, предметные стекла. Объект исследования–человек.

Физиология эритроцитов и гемоглобина
Мотивационная характеристика темы.Знание функций эритроцитов, гемоглобина и их осмотической резистентности необходимо для понимания роли крови как внутреннй среды организма, обеспе

Методика подсчета эритроцитов крови в счетной камере Горяева
Для работы необходимы: скарификаторы, ватные шарики, спирт, эфир, счетная камера Горяева, смеситель (меланжер) для подсчета эритроцитов, 3% раствор натрия хлорида, микроскоп. Об

Методика вычисления цветового показателя крови

Методика определения скорости оседания эритроцитов (СОЭ)
Для работы необходимы: скарификаторы, ватные шарики, спирт, 5% раствор цитрата натрия, капилляр Панченкова, штатив Панченкова, часовое стекло или пробирка Видаля. Объект исследо

Методика определения осмотической устойчивости эритроцитов
Для работы необходимы: штатив с 18 пробирками, растворы хлорида натрия убывающей концентрации 0,9%, 0,85%, 0,8% и т.д. до 0,1% раствора), пробирка с дистиллированной водой, пробирк

Методика определения среднего содержания гемоголобина в одном эритроците (СГЭ)
Для работы необходимы: полученные ранее показатели уровня гемоглобина и количества эритроцитов образца анализа крови. Объект исследования–человек.

Исследование защитных свойств крови. функции лейкоцитов. Понятие про иммунитет, его виды
Мотивационная характеристика темы.Знание защитных свойств крови, функций лейкоцитов необходимо для понимания механизмов иммунологических реакций в изменяющихся условиях окружающей

Методика подсчета лейкоцитарной формулы в мазке крови
Для работы необходимы: приготовленный ранее мазок крови, окрашенный по Романовскому-Гимза, микроскоп, иммерсионное масло. Объект исследования–человек.

Виды и механизмы гемостаза. Физиология тромбоцитов
Мотивационная характеристика темы.Знание гемостатических свойств крови, функций тромбоцитов необходимо для понимания механизмов тромбообразования и поддержания крови в жидком состо

Методика графической регистрации процесса свертывания крови (тромбоэластография)
Для работы необходимы: тромбоэластограф, скарификаторы, ватные шарики, спирт, специальный капилляр. Объект исследования–человек.

Методика регистрации процесса свертывания и рекальцификации плазмы с помощью коагулографии
Для работы необходимы: коагулограф, скарификаторы, ватные шарики, спирт, специальный капилляр, 1,29% раствор СаСL, цитратная плазма Объект исследования–чело

Определение времени свертывания крови по методу фонио

Определение времени свертывания крови по методу Ли и Уайта
Для работы необходимы: скарификаторы, ватные шарики, спирт, пробирка, секундомер. Объект исследования–человек. Проведение работы:

Определение времени продолжительности кровотечения по методу Дюка
Для работы необходимы: скарификаторы, ватные шарики, спирт, пробирка, секундомер. Объект исследования–человек. Проведение работы:

1. Здоровый мальчик 5 лет, неосторожно обращавшийся с ножом, порезал палец, из которого течет кров. Сколько времени будет примерно длиться кровотечение? A. Несколько секунд

Физиологические основы методов исследования групп крови
Мотивационная характеристика темы.Знание учения о группах крови необходимо для понимания принципов переливания крови и методов постановки проб совместимости перед переливанием.

Методика определения групп крови по системе АВО с помощью стандартных сывороток
Стандартные сыворотки – это очищенная в фабричных условиях плазма доноров разных групп крови, не содержащая фибриногена, с высокой концентрацией антител к одному или нескольким ант

Возможные Ошибки при определении групп крови
Отсутствие агглютинации может наблюдаться в следствие: - ошибочного соотношения исследуемой крови и стандартной сыворотки - слабого титра стандартных сывороток

Методика определения групп крови по системе аво с помощью цоликлонов
Цоликлоны анти-А и анти-В - это специфические иммуноглобулины, т.е. антитела (агглютинины) к групповым антигенам А и В, которые образуются одноклональными В-лимфоцитами в ответ на

Мероприятия, проводимые перед переливанием крови
1. Определение групповой совместимости крови реципиента и донора 2. Опредление индивидуальной совместимости крови реципиента и донора 3. Определение совместимости крови реципиента

Практические навыки по физиологии системы крови
Мотивационная характеристика темы. Закрепление практических навыков методов исследования функциональных состояний системы крови, примененяемых с целью диагностики и лечения в клини

Исследование вариабельности частоты сердечных сокращений в покое у здоровых людей с построением кривой нормального распределения данного признака
Известно, что частота сердечных сокращений определяется автоматической активностью различных отделов проводящей системы миокрада. В нормальных условиях главным водителем ритма является синоатриальн

насосная фунция сердца. сердечный цикл, методы его исследования
Мотивационная характеристика темы.Знание структуры сердечного цикла и механизмов его фаз необходимо для понимания процессов функционирования миокрада, обеспечивающего кровоснабжени

Определение длительности сердечного цикла у человека по пульсу в покое и при физической нагрузке
Частота сердечных сокращений у человека, находящегося в состоянии физического и эмоционального покоя, колеблется в пределах 60-80 уд./мин. При физической нагрузке частота сердечных

Оценка и анализ результатов электрокардиографии
Электрокардиограмма – это графическая запись разности потенциалов кардиомиоцитов, отражающая процесс распространения возбуждения по проводящей системе к миокарду. Основные компоненты ЭКГ – интервал

Исследование нервной регуляции деятельности сердца
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов регуляции деятельности сердца необходимо для понимания процессов функционирования миокрада в условиях действия различных нервных

Влияние рефлекса Данини-Ашнера на частоту сердечных сокращений у человека
У человека при надавливании на глазные яблоки частота сердечных сокращений может снижаться. Этот эффект объясняют рефлекторным возбуждением ядер блуждающего нерва. Для работы необ

Исследование гуморальной регуляции деятельности сердца
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов регуляции деятельности сердца необходимо для понимания процессов функционирования миокрада в условиях действия различных гуморал

системное кровообращение. Законы гемодинамики, роль сосудов в кровообращении. Исследование артериального давления
Мотивационная характеристика темы.Знание основных принципов гемодинамики необходимо для обеспечения возможных путей поддержания гомеостаза в условяих различных функциональных состо

Измерение артериального давления у человека пальпаторным методом рива-роччи
Для работы необходим сфигмоманометр. Объект исследования–человек. Проведение работы. Накладывают на плечо манжетку так, как указан

Измерение артериального давления (ад) у человека методом короткова
Величина АД–это один из показателей, по которому можно судить о работе сердца и состоянии сосудов организма. Аускультативный метод измерения АД по Короткову основывается на выслуши

Исследование регуляции кровообращения. Регуляция тонуса сосудов
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов регуляции артериального давления необходимо для понимания процессов подережания гомеостаза в условиях действия различных нервных

Исследование изменения артериального давления и частоты сердечных сокращений у человека при физической нагрузке
Физическая нагрузка влияет на деятельность сердечнососудистой системы, увеличивая, как правило, систолическое давление и частоту сердечных сокращений (ЧСС). Изменения этих показателей зависят как

Исследование изменения артериального давления и частоты сердечных сокращений у человека при воздействии холода
Сердечно-сосудистая система реагирует на любые воздействия внешней среды, в том числе и на температурные. В понятие метеочувствительности входят и реакции сердечно-

Исследование микроциркуляции и особенностей регионального кровотока
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов микроциркуляции и особенностей регионального кровотока необходимо для понимания процессов поддержания гомеостаза в условиях дейс

Наблюдение венозного кровотока
Основная функция венозной системы–это возврат крови к сердцу, поэтому кровь по венам течет в направлении от периферии к центру, к сердцу. Этому способствуют такие факторы, как ост

Исследование лимфообращения
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов функционирования лимфатической системы необходимо для понимания процессов метаболизма в тканях и динамической связи между клетка

Изучение стимулирующих влияний раздражения желудка у спинальной лягушки на работу ее лимфатического сердца
ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ УРОВНЯ знаний: 1. Куда необходимо провести катетер у животного, чтобы собрать лимфу из грудного лимфатического протока? A.

практические навыки по физиологии системы кровообращения
Мотивационная характеристика темы.. Закрепление практических навыков методов исследования функциональных состояний системы кровообращения, примененяемых с целью диагностики и лечен

Общая характеристика системы дыхания. Анализ спирограммы
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов внешнего дыхания и анализ его показателей необходимы для понимания и оценки процесса дыхания при различных функциональных состоя

1. Исследование жизненной емкости легких с помощью спирометрии. 2. Исследование показателей внешнего дыхания с помощью спирографии. Исследование жизненной е

Исследование внешнего дыхания. Исследование механизма вдоха и выдоха
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов вдоха и выдоха необходимо для оценки состояния органов дыхания во врачебной практике. Цели занятия: зн

Исследование максимальной скорости вдоха и выдоха при форсированном дыхании (Пневмотахометрия)
Измерение максимальной скорости вдоха и выдоха при форсированном дыхании (пневмотахометрия) является простейшим методом диагностики нарушений проходимости бронхов и зависит как от силы дыхательной

исследование газообмена в легких
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов газообмена необходимо для понимания процессов метаболизма в тканях при различных функциональных состояниях и, в случае необходим

Определение парциального давления кислорода и углекислого газа в альвеолярном воздухе
ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ УРОВНЯ знаний: 1. Каково содержание растворенного кислорода в нормальной артериальной крови? A. 0.9-1,4 об% B. 1.5

Транспорт газов кровью, значение для организма
2. Роль гемоглобина и миоглобина в дыхании. 3. Кривая диссоциации оксигемоглобина. Факторы, влияющие на образование и диссоциацию оксигемоглобина. 4. Кислородная емкость крови, ме

D. Возникновению деструкции тканей
E. Ведёт к развитию гипоксии тканей 2. Показателем, отражающим положение кривой диссоциации оксигемоглобина, является… A. РO2 при 100% на

E. Все ответы неправильные
Ответы: 1-B. 2-C. 3-D. 4-C. 5-C. 6-C. 7-C. 8-A. 9-D. 10-C. Ситуационные задачи: 1. У больног

исследование нервной регуляции дыхания
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов регуляции дыхания необходимо для понимания процессов функционирования системы дыхания в условиях действия различных нейрогенных

исследования гуморальной регуляции дыхания
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов регуляции дыхания необходимо для понимания процессов функционирования системы дыхания в условиях действия различных гуморальных

E. уменьшится глубина и частота дыхания
Ответы: 1-D. 2-B. 3-A. 4-C. 5-D. 6-D. 7-C. 8-A. 9-D. 10-C. ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ УРОВНЯ знаний по программе «Крок» 1. Какое

практические навыки по физиологии системы дыхания
Мотивационная характеристика темы.. Закрепление практических навыков методов исследования системы дыхания, примененяемых с целью диагностики и лечения в клинике является необходимы

Энергетический обмен
Конкретные цели: 1. Делать выводы об интенсивности метаболизма на основе анализа энергетических затрат, характеризующих основной обмен. 2. Делать выводы о преобла

энергетический и основной обмен и методы его исследования
Мотивационная характеристика темы.Знание процессов метаболизма и методов его определения необходимо для понимания единства и уравновешенности анаболических и катаболическх процессо

Исследование состояния обмена веществ человека по анализу индекса массы тела
Избыточная масса тела–один из факторов риска для здоровья. Интенсивность этого фактора возрастает от 4% при удовлетворительной адаптации до 52% при неудовлетворительной адап

Терморегуляция
1. Анализировать температуру тела гомойотермных организмов и делать выводы о механизмах регуляции баланса между теплообразованием и теплоотдачей. 2. Анализировать состояние терморегуляции

температура тела и регуляция ее постоянства
Мотивационная характеристика темы.Знание механзмов терморегуляции необходимо для понимания процессов поддержания гомеостаза в организме человека, обеспечивающих нормальный уровень

Исследование наличия тепловых и холодовых рецепторов кожи
Терморецепторы расположены в коже глубже, чем тактильные. Холодовые раздражения воспринимаются колбами Краузе, тепловые – тельцами Руффини. Плотность их расположения: 10-13 холодовых и 1-2 тепловых

Система пищеварения
Конкретные цели: 1. Трактовать понятия системы пищеварения и механизмы регуляции ее физиологических функций – секреторной, моторной, всасывательной. 2. Делать выв

Исследование порогов вкусовой чувствительности
Различают четыре «первичных» вкусовых ощущения: сладкое, кислое, соленое, горькое. Порог вкусовой чувствительности–это минимальная концентрация исследуемого вещества, которая выз

Исследование вкусовых полей языка
Для работы необходимы: 10% раствор сахара, 10% раствор NaCl , 1% раствор лимонной кислоты, 0,5% раствор гидрохлорида хинина, глазная пипетка, стакан с водой. Объект исследовани

Исследование преваривающего действия слюны на крахмал
Для работы необходимы: 6 мл слюны человека, 1% раствор крахмала сырого и вареного, реактивы Фелинга II, водяная баня, 6 пробирок, спиртовка, стакан с водой. Объект исследования

Пищеварение в желудке. Методы исследования пищеварения в желудке
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов пищеварения в полости желудка необходимо для понимания механизмов функционирования системы питания при различных функциональных

Оценка секреторной функции желудка по результатам анализа желудочного сока
Для работы необходимы: результаты исследования желудочного сока человека. Объект исследования–человек. Проведение работы: Использу

Тестовые задания для самоконтроля уровня знаний
1. Больному была произведена резекция желудка с удалением пилорического отдела. Какие процессы в ЖКТ были нарушены? A. Переход химуса в двенадцатиперстную кишку B. Перистальт

Пищеварение в двенадцатиперстной кишке (ДПК). Роль поджелудочного сока и желчи в процессах пищеварения
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов пищеварения в двенадцатиперстной кишке необходимо для понимания механизмов функционирования системы питания при различных функци

Исследование эмульгирования жиров
За сутки у человека отделяется 1000-1500 мл желчи, одной из функций которой является эмульгирование жиров, делая водорастворимыми жирные кислоты. Для работы необхо

Пищеварение в кишках. Физиологические основы голода и насыщения
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов пищеварения в кишках необходимо для понимания механизмов функционирования системы питания при различных функциональных состояния

Программа практической работы на занятии
1. Построение контура регуляции процессов голода и насыщения. ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ УРОВНЯ знаний: 1. У больного нарушен синтез энтерокиназы. Как

моторная деятельность желудка и кишек. Процессы всасывания
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов всасывания и моторной деятельности органов желудочно-кишечного тракта необходимо для понимания механизмов функционирования систе

Программа практической работы на занятии
1. Построение контура регуляции постоянства состава питательных веществ во внутренней среде организма. ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ УРОВНЯ знаний: 1. У

Практические навыки по физиологии системы пищеварения
Мотивационная характеристика темы. Закрепление практических навыков методов исследования функциональных состояний органов системы пищеварения, примененяемых с целью диагностики и л

Система выделения
Конкретные цели: 1. Объяснить понятия системы выделения и механизмы регуляции гомеостаза при ее участии на основе анализа констант - объема циркулирующей крови, концентрац

общая характеристика и функции системы выделения. Роль почек в процессах выделения, механизм мочеобразования
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов мочеобразования необходимо для понимания функционирования системы выделения при различных функциональных состояниях, что обеспеч

Программа практической работы на занятии
1. Рассчитать скорость фильтрации в клубочках, используя данные раздаточного материала. Сделать вывод. 2. Определить величину реабсорбции воды в нефроне, используя данные раздаточного мате

регуляция функций почек
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов регуляции функций почек необходимо для понимания процессов функционирования системы выделения различных функциональных состояния

Программа практической работы на занятии
1. Составление контура регуляции процесса мочеиспускания. При регуляции процесса мочеиспускания отрицательная и положительная обратные связи взаимодействуют, что обеспечивает эффективное о

роль почек в поддержании гомеостаза
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов поддержания гомеостаза почками необходимо для понимания процессов функционирования системы выделения при различных функциональны

Программа практической работы на занятии
1. Построение контура регуляции ренин-ангиотензин-альдостероновой системы. ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ УРОВНЯ знаний: 1. В эксперименте на животных раз

E. Водной нагрузке и приеме острой пищи
10. В каком отделе нефрона в основном реабсорбируется глюкоза? A. проксимальном B. дистальном C. собирательных трубочках D. петле Генле

практические навыки по физиологии системы выделения
Мотивационная характеристика темы.Знание практических навыков исследования функционального состояния органов мочевыделительной системы необходимо для понимания механизмов функциони

E. 60-100 мл
Ответы: 1-D., 2-B., 3-B., 4-D., 5-C., 6-E., 7-C., 8-D., 9-C., 10-D. Ситуационные задачи: 1. При заболева

Физиология крови
1. Общая характеристика системы крови, состав и функции крови. 2. Понятие о гемостазе, механизмы гемостаза и механизмы его регуляции. 3. Электролиты плазмы крови, их количество. О

Потенциал действия типичных кардиомиоцитов желудочков, механизм его возникновения, графическое изображение, физиологическая роль
8. Соотношения по времени ПД и одиночного сокращения миокарда. 9. Периоды рефрактерности во время развития ПД типичных кардиомиоцитов, их значение. 10. Сопряжение возбуждения и со

Метаболизм и терморегуляция
17. Источники и пути использования в энергии в организме человека. 18. Методы определения энергозатрат человека. Дыхательный коэффициент. 19. Основной обмен и условия его определе

Пищеварение
27. Дайте определение и опишите структуру системы пищеварения. 28. Перечислите основные функции пищеварения. 29. Перечислите этапы обработки пищи в ротовой полости. 30. Н

Выделение
68. Система выделения, ее функции. Особенности почечного кровотока. 69. Органы выделения – почки, легкие, кожа, желудочно-кишечный тракт. 70. Строение и функции структурно-функцио

Рисовать схемы контуров регуляции системного кровообращения при различных физиологических состояниях организма
21. Трактовать роль особенностей регионального кровообращения и его регуляции (легочного, коронарного, мозгового, брюшного) для обеспечения приспособительных реакцій 22. Оценивать состояни

Лейкоциты. Норма – (4–9)х109/л крови. Их количество зависит от скорости образования в лимфатических узлах, селезенке и костном мозге, мобилизации из костного мозга, утилизации и миграции в ткани, захвата легкими и селезенкой, физиологических факторов. Основная функция гранулоцитов (прежде всего нейтрофильных) фагоцитарная – захват и переваривание с помощью гидролитических ферментов чужеродного материала. При оценке количества лейкоцитов в клинике используется лейкоцитарная формула – процентное соотношение отдельных форм лейкоцитов. В норме эта величина постоянная.

Лейкоцитарная формула

Повышение числа лейкоцитов до нескольких десятков тысяч свидетельствует о лейкоцитозе и наблюдается при острых воспалительных и инфекционных заболеваниях, сопровождается сдвигом лейкоцитарной формулы влево. Повышение числа лейкоцитов до нескольких сотен тысяч указывает на лейкоз. При тяжелых инфекционных заболеваниях изменяется морфология нейтрофилов: отмечаются дегрануляция, вакуолизация и т. д. Уменьшение числа лейкоцитов ниже 4000 указывает на лейкопению , чаще агранулоцитоз. Уменьшение числа белых кровяных телец может быть связано с применением различных лекарств, повышенным радиоактивным фоном, урбанизацией и др. Нейтропения проявляется под влиянием цитостатиков, при волчанке, ревматоидном артрите, малярии, сальмонеллезе, бруцеллезе, как специфический синдром – при СПИДе и облучении.

Лейкоциты нейтрофильные. Содержание в крови – 50–75% (2,2–4,2)х109/л. Диаметр –10–12 мкм.

Ядро компактное, состоит из 3–4 сегментов, соединенных мостиками; цитоплазма с обильной зернистостью. При инфекциях и воспалениях нейтрофилы выполняют функцию макрофагов – клеток, способных к фагоцитозу.

Лейкоциты эозинофильные . Норма – 1–5% лейкоцитов, (0,1–0,3)х109/л. Клетки крупнее нейтрофилов, диаметр до 12 мкм. Ядро состоит чаще из 2–3 сегментов. Цитоплазма слегка базофильная, содержит крупную, ярко окрашивающуюся эозином зернистость, дающую положительную оксидазную, пероксидазную, цитохромоксидазную, сукцинатдегидрогеназную, кислофосфатазную реакции. Способны к фагоцитозу, принимают участие в дезинтоксикации продуктов белковой природы и аллергических реакциях организма.Эозинофилия характерна для гельминтозов, возможна на стадии выздоровления при инфекционных заболеваниях.

Лейкоциты базофильные. Содержание в крови – 0–1% (до 0,06х109/л). Диаметр от 8 до 12 мкм. Ядро широкое, неправильной формы. Цитоплазма содержит крупную зернистость, окрашивающуюся метахроматически в фиолетово-черные тона. Участвуют в аллергических реакциях (немедленного и замедленного типов): продуцируют гистамин и гепарин (группа гепариноцитов).

Моноциты/макрофаги. Норма – 2–10% лейкоцитов, (0,2–0,55)х109/л. Размеры от 12 до 20 мкм. Ядро крупное, рыхлое, с неравномерным распределением хроматина. В крови циркулируют недолго, переходят в ткани, трансформируясь в макрофаги, способны к амебовидному движению. Ведущие клетки иммунного ответа организма. Основная функция – эндоцитоз. Являются центральным звеном мононуклеарной фагоцитарной системы. Выполняют ряд цитокинзависимых функций: гемопоэтическую, иммуностимулирующую, провоспалительную, иммуносупрессивную и противовоспалительную.

Продукты секреции макрофагов:

Протеазы: активатор плазминогена, коллагеназа, эластаза, ангиотензинконвертаза.

Медиаторы воспаления и иммуномодуляции: интерлейкин-1 (ИЛ-1), фактор некроза опухоли α, интерферон γ, лизоцим, фактор активации нейтрофилов, компоненты комплемента С1, С2, С3, С5, пропердин, факторы В, Д, ИЛ-3, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-10, ИЛ-12, ИЛ-15.

Факторы роста: КСФ-ГМ, КСФ-Г, КСФ-М, фактор роста фибробластов, трансформирующий фактор роста.

Фактор свертывающей системы и ингибиторы фибринолиза: V, VII, IX, X, ингибиторы плазминогена, ингибиторы плазмина.

Адгезивные вещества: фибронектин, тромбоспондин, протеогликаны.

Метод подсчета в камере

Взятие и разведение крови производят пробирочным методом. В пробирку (лучше видалевскую) вносят 0,4 мл разводящей жидкости и 0,02 мл капиллярной крови. Полученное разведение практически считается равным 1: 20. В качестве разводящей жидкости обычно употребляют 3-5%-ный раствор уксусной кислоты, подкрашенной метиленовым синим (уксусная кислота лизирует эритроциты, метиленовый синий окрашивает ядра лейкоцитов). Перед заполнением камеры Горяева пробирку с разведенной кровью тщательно встряхивают. Камеру заполняют так же, как для подсчета эритроцитов.

Лейкоцитов гораздо меньше, чем эритроцитов (1-2 на большой квадрат), поэтому для точности подсчет производят в 100 больших квадратах (неразграфленных).

Расчет: в 100 больших квадратах (1600 малых) сосчитано а лейкоцитов. Помня, что объем малого квадрата равен 1/4000 мм 3 , а кровь разведена в 20 раз, рассчитывают количество лейкоцитов в 1 мкл крови: 4000*20 и делят на 1600 = а*1/2. Практически для получения действительного содержания лейкоцитов в 1 мкл крови достаточно полученное при подсчете число разделить пополам и приписать 2 нуля. В среднем ошибка метода составляет ± 7%.

Более точным (ошибка 2-3%) и совершенным является подсчет лейкоцитов с помощью электронных аппаратов. Подсчет лейкоцитов в счетчиках частиц производят по тому же принципу, что и эритроцитов. Предварительно кровь разводят и смешивают с каким-либо лизирующим эритроциты реактивом. В автоанализаторе «Техникон» в качестве такового применяют раствор уксусной кислоты, в аппаратах «Культер» и «Целлоскоп» - сапонин или сапоглобин, которые добавляют разведенными (1: 500, 1: 700) в изотоническом растворе хлорида натрия (6 капель на 20 мл разведения).

12. Функции Гранулоцитов. Роль Т- и В- лимфоцитов в создании специфических механизмов иммунитета:

Главными клетками иммунной системы являются Т- и В-лимфоциты, которые циркулируют в системе кровотока и лимфотока, постоянно перемещаясь из одних органов иммунной системы в другие, обладают способностью выходить в ткани для выполнения защитных функций (рис.1).

В защитных реакциях специфического иммунитета кроме Т- и В-лим-фоцитов участвуют фагоцитирующие клетки (гранулоциты, моноциты, макрофаги), «естественные киллеры», тучные клетки, эндотелиальные и эпителиальные клетки, которые играют роль вспомогательных, взаимодействуя с Т- и В-лимфоцитами.

Иммунный ответ состоит из сложного ряда клеточных взаимодействий, активируемых попаданием в организм чужеродного антигенного материала. Сначала макрофаг захватывает несущий антигены организм. Затем макрофаг отщепляет часть антигена (пептид) и выводит его на свою поверхность, как бы предъявляя иммунным клеткам. Активация лимфоцита антигеном приводит к пролиферации и трансформации лимфоцитов.

Лимфоциты - это единственные клетки организма, способные специфически распознавать собственные и чужеродные антигены и отвечать активацией на контакт с конкретным антигеном. При весьма сходной морфологии лимфоциты делятся на две популяции, имеющие различные функции и продуцирующие разные белки.

Одна из популяций получила название В-лимфоциты. У человека В-лимфоциты созревают в костном мозге. В-лимфоциты распознают антигены специфическими рецепторами иммуноглобулиновой природы, которые по мере созревания В-лимфоцитов появляются на их мембранах. В-лимфоциты, способны распознавать и связывать белковые, полисахаридные и липопротеидные растворимые антигены.Главной функцией В-лимфоцитов является специфическое распознавание антигена. Узнавание антигена приводит к активации, пролиферации и преобразованию В-лимфоцитов в плазматические клетки - продуценты специфических антител - иммуноглобулинов. Таким образом формируется гуморальный иммунный ответ. Чаще всего В-лимфоциты для развития гуморального иммунного ответа нуждаются в помощи Т-лимфоцитов в виде продукции активирующих цитокинов.

Другая популяция получила название Т-лимфоциты в связи с дифференцировкой их предшественников в тимусе. Т-лимфоциты выполняют важнейшую функцию специфического распознавания и связывания антигена. Активированные антигенами Т-лимфоциты пролиферируют и превращаются в различные субпопуляции, участвующие далее во всех формах иммунного ответа. Активированный Т-лимфоцит так же продуцирует и выделяет цитокины, усиливающие процессы увеличения количества самих Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов и макрофагов.

Среди зрелых Т-лимфоцитов различают две основные субпопуляции: Т-хелперы (CD4+) и Т- киллеры - цитотоксические Т-лимфоциты (CD8+). Маркировка «CD» является характеристикой «поверхностного фенотипа клетки» - «кластер дифференцировки» (от английского clusters of differentiation - CD).

Имеется еще один тип лимфоцитов - большие гранулярные лимфоциты, отличающиеся от меньших по величине Т- и В-лимфоцитов не только особенностями структуры, но и отсутствием антигенраспознающего рецептора. Эти клетки получили название «естественные киллеры» : они способны убивать инфицированные разными вирусами клетки-мишени или опухолевые клетки (см. табл. 1).

Таблица 1. Классификация лимфоцитов человека

Т-клетки разрушающе действуют на следующие объекты:

1. Злокачественные клетки.

2. Клетки, инфицированные микроорганизмами.

3. Трансплантированные органы и ткани.

В атаке участвует вся клетка, поэтому ответ называется клеточным иммунитетом.

Таким образом, существует два главных типа иммунного ответа:

· Клеточный иммунитет это функция T-лимфоцитов.

· Гуморальный иммунитет – с участием В-лимфоцитов.

Существует еще одна субпопуляция Т-лимфоцитов: регуляторные Т-лимфоциты, Т-регуляторные клетки Тreg), Т-супрессоры - центральные регуляторы иммунного ответа. Основная их функция - контролировать силу и продолжительность иммунного ответа через регуляцию функции Т-эффекторных клеткок (Т-хелперов и Т-цитотоксических клеток).

Рис. 2. Общая схема иммунного ответа

Феномен супрессии иммунного ответа был известен давно, но не были известны его механизмы. Поэтому было предположено существование специфических клеток Т-супрессоров, однако существование этих клеток долгое время не было подтверждено экспериментально. Лишь в конце 1990-х и в начале 2000-х годов было показано существование определенных Т-клеток, которые характеризовались фенотипом CD25+FOXP3+ и эффективно подавляли иммунный ответ.

13. иммунитет, его неспецифические и специфические механизмы:

Адаптивный (устар. приобретённый, специфический) иммунитет имеет способность распознавать и реагировать на индивидуальные антигены, характеризуется клональным ответом, в реакцию вовлекаются лимфоидные клетки, имеется иммунологическая память, возможна аутоагрессия.

Классифицируют на активный и пассивный.

Приобретённый активный иммунитет возникает после перенесённого заболевания или после введения вакцины.
Приобретённый пассивный иммунитет развивается при введении в организм готовых антител в виде сыворотки или передаче их новорождённому с молозивом матери или внутриутробным способом.

Другая классификация разделяет иммунитет на естественный и искусственный.

Естественный иммунитет включает врождённый иммунитет и приобретённый активный (после перенесённого заболевания), а также пассивный иммунитет при передаче антител ребёнку от матери.
Искусственный иммунитет включает приобретённый активный после прививки (введение вакцины) и приобретённый пассивный (введение сыворотки).

Врождённый (неспецифический) иммунитет обусловлен способностью идентифицировать и обезвреживать разнообразные патогены по наиболее консервативным, общим для них признакам, дальности эволюционного родства, до первой встречи с ними. В 2011 году была вручена Нобелевская премия в области медицины и физиологии за изучение новых механизмов работы врождённого иммунитета (Ральф Стайнман, Жюль Хоффман и Брюс Бётлер).

Осуществляется большей частью клетками миелоидного ряда, не имеет строгой специфичности к антигенам, не имеет клонального ответа, не обладаетпамятью о первичном контакте с чужеродным агентом.

14. Мононуклеарно-фагоцитарная система:

Система мононуклеарных фагоцитов (греч. monox один + лат. nucleos ядро: греч. рhagos пожирающий, поглощающий + гистол. суtus клетка; синоним: макрофагальная система, моноцитарно-макрофагальная система) - физиологическая защитная система клеток, обладающих способностью поглощать и переваривать чужеродный материал. Клетки, входящие в состав этой системы, имеют общее происхождение, характеризуются морфологическим и функциональным сходством и присутствуют во всех тканях организма.

Основой современного представления о cистема мононуклеарных фагоцитов является фагоцитарная теория, разработанная И.И. Мечниковым в конце 19 в., и учение немецкого патолога Ашоффа (К. А.L. Aschoff) о ретикулоэндотелиальной системе (РЭС). Первоначально РЭС была выделена морфологически как система клеток организма, способных накапливать витальный краситель кармин. По этому признаку к РЭС были отнесены гистиоциты соединительной ткани, моноциты крови, клетки Купфера печени, а также ретикулярные клетки кроветворных органов, эндотелиальные клетки капилляров, синусов костного мозга и лимфатического узлов. По мере накопления новых знаний и совершенствования морфологических методов исследования стало ясно, что представления о ретикулоэндотелиальной системе расплывчаты, не конкретны, а в ряде положений просто ошибочны. Так, например, ретикулярным клеткам и эндотелию синусов костного мозга и лимфатических узлов длительное время приписывалась роль источника фагоцитирующих клеток, что оказалось неверным.

В настоящее время установлено, что мононуклеарные фагоциты происходят из циркулирующих моноцитов крови. Моноциты созревают в костном мозге, затем поступают в кровяное русло, откуда мигрируют в ткани и серозные полости, становясь макрофагами. Ретикулярные клетки выполняют опорную функцию и создают так называемое микроокружение для кроветворных и лимфоидных клеток. Эндотелиальные клетки осуществляют транспорт веществ через стенки капилляров. Непосредственного отношения к защитной системе клеток ретикулярные клетки и эндотелий сосудов не имеют. В 1969 г. на конференции в Лейдене, посвященной проблеме РЭС, понятие «ретикулоэндотелиальная система» было признано устаревшим. Вместо него принято понятие «система мононуклеарных фагоцитов». К этой системе относят гистиоциты соединительной ткани, клетки Купфера печени (звездчатые ретикулоэндотелиоциты), альвеолярные макрофаги легких, макрофаги лимфатических узлов, селезенки, костного мозга, плевральные и перитонеальные макрофаги, остеокласты костной ткани, микроглию нервной ткани, синовиоциты синовиальных оболочек, клетки Лангергаиса кожи, беспигментные гранулярные дендроциты. Различают свободные, т.е. перемещающиеся по тканям, и фиксированные (резидентные) макрофаги, имеющие относительно постоянное место.

Макрофаги тканей и серозных полостей, по данным сканирующей электронной микроскопии, имеют форму, близкую к сферической, с неровной складчатой поверхностью, образованной плазматической мембраной (цитолеммой). В условиях культивирования макрофаги распластываются на поверхности субстрата и приобретают уплощенную форму, а при перемещении образуют множественные полиморфные псевдоподии.

Характерным ультраструктурным признаком макрофага служит наличие в его цитоплазме многочисленных лизосом и фаголизосом, или пищеварительных вакуолей. Лизосомы содержат различные гидролитические ферменты, обеспечивающие переваривание поглощенного материала. Макрофаги - активные секреторные клетки, которые освобождают в окружающую среду ферменты, ингибиторы, компоненты комплемента. Основным секреторным продуктом макрофагов является лизоцим. Активированные макрофаги секретируют нейтральные протеиназы (эластазу, коллагеназу), активаторы плазминогена, факторы комплемента, такие как С2, С3, С4, С5, а также интерферон.

Клетки cистема мононуклеарных фагоцитовобладают рядом функций, в основе которых лежит их способность к эндоцитозу, т.е. поглощению и перевариванию инородных частиц и коллоидных жидкостей. Благодаря этой способности они выполняют защитную функцию. Посредством хемотаксиса макрофаги мигрируют в очаги инфекции и воспаления, где осуществляют фагоцитоз микроорганизмов, их умерщвление и переваривание. В условиях хронического воспаления могут появляться особые формы фагоцитов - эпителиоидные клетки (например, в инфекционной гранулеме) и гигантские многоядерные клетки типа клеток Пирогова - Лангханса и типа клеток инородных тел. которые образуются путем слияния отдельных фагоцитов в поликарион - многоядерную клетку. В гранулемах макрофаги вырабатывают гликопротеид фибронектин, который привлекает фибробласгы и способствует развитию склероза.

Клетки cистема мононуклеарных фагоцитов принимают участие в иммунных процессах.

Так, непременным условием развития направленного иммунного ответа является первичное взаимодействие макрофага с антигеном. При этом антиген поглощается и перерабатывается макрофагом в иммуногенную форму. Иммунная стимуляция лимфоцитов происходит при непосредственном контакте их с макрофагом, несущим преобразованный антиген. Имунный ответ в целом осуществляется как сложное многоэтапное взаимодействие Г- и В-лимфоцитов с макрофагами.

Макрофаги обладают противоопухолевой активностью и проявляют цитотоксические свойства в отношении опухолевых клеток. Эта активность особенно выражена у так называемых иммунных макрофагов, осуществляющих лизис опухолевых клеток-мишеней при контакте с сенсибилизированными Т-лимфоцитами, несущими цитофильные антитела (лимфокины).

Клетки cистема мононуклеарных фагоцитов принимают участие в регуляции миелоидного и лимфоидного кроветворения. Так, островки кроветворения в красном костном мозге, селезенке, печени и желточном мешке эмбрионе формируются вокруг особой клетки - центрального макрофага, организующего эритропоэз эритробластического островка. Клетки Купфера печени участвуют в регуляции кроветворения путем выработки эритропоэтина. Моноциты и макрофаги вырабатывают факторы, стимулирующие продукцию моноцитов, нейтрофилов и эозинофилов. В вилочковой железе (тимусе) и тимусзависимых зонах лимфоидных органов обнаружены так называемые интердигитирующие клетки - специфические стромальные элементы, также относящиеся к cистемs мононуклеарных фагоцитов, ответственные за миграцию и дифференцировку лимфоцитов.

Обменная функция макрофагов заключается в их участии в обмене железа.

В селезенке и костном мозге макрофаги осуществляют эритрофагоцитоз, при этом в них происходит накопление железа в форме гемосидерина и ферритина, которое питом может реутилизироваться эритробластами.

15. Лейкоцито и его виды. Лейкопения:

Лейкоцитарная формула - это процентное соотношение отдельных видов лейкоцитов в периферической крови. Лейкоцитарная формула видоизменяется определенным образом, типично для каждого определенного заболевания. Лейкоциты при различных заболеваниях, чаще при инфекциях, изменяются в количественном отношении.

Повышение числа лейкоцитов - лейкоцитоз, снижение - лейкопения.

Лейкоцитоз может быть физиологическим и патологическим, первый возникает у здоровых людей, второй - при каких-то болезненных состояниях. Лейкоцитоз - изменение клеточного состава крови, характеризующееся повышением числа лейкоцитов. Норма лейкоцитов в крови - 3,5 - 8,8?109/л, но этот показатель может отличаться в большую или меньшую сторону, в зависимости от лаборатории и используемых методов.

Лейкоцитоз может быть физиологическим и патологическим, первый возникает у здоровых людей, второй - при каких-то болезненных состояниях. К физиологическому относят алиментарный лейкоцитоз (после приема пищи), миогенный (после физического напряжения), лейкоцитоз беременных и др. Патологический лейкоцитоз обусловлен реакцией кроветворных органов на раздражение, вызванное инфекционными, токсическими, гнойно-воспалительными, лучевыми и другими агентами. Он наблюдается также при некрозе ткани (инфаркт миокарда, распад опухоли), после больших кровотечений, ранений, черепно-мозговых травм и др. Как правило, лейкоцитоз исчезает вместе с вызвавшей его причиной. Преходящий лейкоцитоз, характеризующийся появлением в крови незрелых лейкоцитов, называют лейкемоидной реакцией.

Лейкопения - уменьшение числа лейкоцитов в крови при некоторых инфекционных и других заболеваниях, а также в результате лучевого поражения, приема лекарственных препаратов или рефлекторных воздействий на костный мозг.

К лейкопении приводят лучевое поражение, контакт с рядом химических веществ (бензол, мышьяк, ДДТ и др.); прием медикаментозных препаратов (цитостатические средства, некоторые виды антибиотиков, сульфаниламидов и др.). Лейкопения возникает при вирусных и тяжело протекающих бактериальных инфекциях, заболеваниях системы крови.

При лейкопении необходимо точно выяснить причину заболевания. Наряду с вирусными инфекциями и заболеваниями кроветворящих органов причиной лейкопении может стать побочное действие аллопатических препаратов, так как ряд препаратов оказывает токсическое действие на костный мозг и может посредством аллергических механизмов вызывать лейкопению и агранулоцитоз.

Лечение заключается в назначении препаратов, стимулирующих развитие новых лейкоцитов или стимулирующих выброс созревающих лейкоцитов.

16. Регуляция лейкопоэза:

Регуляция лейкопоэза. Продукция лейкоцитов стимулируется лейкопоэтинами, появляющимися после быстрого удаления из крови большого количества лейкоцитов. Химическая природа и место образования в организме лейкопоэтинов еще не изучены. На лейкопоэз оказывают стимулирующее влияние нуклеиновые кислоты, продукты распада тканей, возникающие при их повреждении и воспалении, и некоторые гормоны. Так, под действием гормонов гипофиза - адренокортикотропного гормона и гормона роста - повышается количество нейтрофилов и уменьшается число эозинофилов в крови.

В стимуляции лейкопоэза большую роль играет нервная система. Раздражение симпатических нервов вызывает увеличение нейтрофильных лейкоцитов в крови. Длительное раздражение блуждающего нерва вызывает перераспределение лейкоцитов в крови: их содержание нарастает в крови мезентериальных сосудов и убывает в крови периферических сосудов; раздражение и эмоциональное возбуждение увеличивают количество лейкоцитов в крови. После еды увеличивается содержание лейкоцитов в крови, циркулирующей в сосудах. В этих условиях, а также при мышечной работе и болевых раздражениях в кровь поступают лейкоциты, находящиеся в селезенке и синусах костного мозга.

Факторы, влияющие на правильность исследования лейкоцитов

Криоглобулинемия

Парапротеинемия

Нормобласты

Агрегаты тромбоцитов

Нелизированные эритроциты

Длительное хранение крови при комнатной температуре

Возраст Количество лейкоцитов

1 день 11.6 - 22.0

1 неделя 8.1.- 14.3

1 месяц 7.6 – 12.4

1 год 6.8 - 11.0

Взрослые 4.0 – 9.0

Методы определения количества лейкоцитов в крови.

Подсчет количества лейкоцитов в счетной камере

Подсчет лейкоцитов в гематологических анализаторах

Определение количества лейкоцитов в счетной камере.

Подсчет лейкоцитов под микроскопом проводят после лизирования эритроцитов в 100 больших квадратах счетной сетки и пересчитывают на 1 л крови, исходя из объема квадратов и разведения крови. Подсчет лейкоцитов должен быть произведен в течение 2-4 ч после взятия крови.

При наличии в периферической крови ядросодержащих клеток красного ряд, они не лизируются и подсчитываются вместе с лейкоцитами. В этом случае, чтобы определить истинное количество лейкоцитов, из общего числа посчитанных клеток вычитают количество клеток красного ряда.

Например: Общее количество лейкоцитов при подсчете в камере (или на анализаторе) -45х109/л. При подсчете лейкоцитарной формулы найдено, что на 100 лейкоцитов присутствует 50 эритробластов (нормобластов).

Рассчитываем истинное количество лейкоцитов в крови:

150 клеток - 45 х 109/л

100 клеток (лейкоциты) - X

Х =100*45*10/л /150 = 30*10/л

Таким образом, истинное число лейкоцитов в крови составляет 30 х109/л.

Основные источники ошибок при подсчете лейкоцитов в камере:

Неправильное соотношение объемов крови и уксусной кислоты, взятых в пробирку.

Неправильно подготовленный раствор уксусной кислоты (при концентрации большей, чем 5%, часть лейкоцитов может лизироваться, что приведет к занижению результата).

Длительное нахождение пробы при температуре выше 28°С, что может ускорить лизис лейкоцитов в образце и привести к занижению результата.

Неправильное заполнение камеры Горяева. Как и при подсчете эритроцитов, камеру необходимо оставлять на 1 минуту для оседания клеток.

Недостаточно хорошо отмытая после предыдущего определения камера Горяева. Оставшиеся в камере лейкоциты могут завышать результаты анализа.

Методы подсчета тромбоцитов

В счетной камере

Мазках крови

Гематологическом анализаторе

Каждая группа методов имеет преимущества и недостатки.

Подсчет тромбоцитов в камере достаточно точен, не требует для расчета количества эритроцитов. С другой стороны этот метод более трудоемкий, поскольку тромбоциты в нативном виде представлены мелкими и плохо контрастированными элементами. Недостаток метода - подсчет тромбоцитов в ближайшие часы после взятия крови.

Определение количества тромбоцитов в мазках крови значительно уступает по своей точности камерному методу или автоматическим счетчикам. Ошибки при подсчете в мазках крови могут быть обусловлены плохим качеством мазка и связанным с этим неравномерным распределением тромбоцитов, неточным определением количества эритроцитов крови. Существенное неудобство метода - необходимость одновременного подсчета тромбоцитов и эритроцитов в крови. Преимущество его - возможность исследования тромбоцитов в любое время, независимо от момента взятия крови.

Метод определения тромбоцитов с помощью гематологического анализатора позволяет достаточно точно определить количество тромбоцитов, их средний объем и распределение по объему.

Dendrit.ru

Подсчета лейкоцитов в счетной камере

Принцип. Подсчет лейкоцитов при микроскопии в определенном числе квадратов счетной камеры и расчет их количества в 1 л крови с учетом разведения крови и объема счетной камеры.

Реактив: 3–5% раствор уксусной кислоты, подкрашенный для окраски ядер лейкоцитов несколькими каплями раствора метиленового синего. Раствор имеет голубой цвет, может длительно храниться.

Ход определения. В сухую пробирку наливают 0,4 мл раствора уксусной кислоты. Из пальца набирают 0,02 мл крови (можно использовать стабилизированную антикоагулянтом венозную кровь). Вытирают кончик пипетки, затем выдувают из нее кровь на дно пробирки, перемешивают, повторно набирая и выдувая смесь крови и реактива (пипетируя). Маркируют пробирку и оставляют ее до момента подсчета. Хранить смесь крови с раствором уксусной кислоты рекомендуется не более 2–4 ч.

Кровь, разведенную в пробирке уксусной кислотой, тщательно перемешивают и заполняют ею счетную камеру. Заполненную камеру оставляют в горизонтальном положении на 1 мин для оседания лейкоцитов. Не меняя горизонтального положения камеры, помещают ее на столик микроскопа и при малом увеличении (окуляр 10×, объектив 8×) подсчитывают лейкоциты в 100 больших квадратах, что соответствует 1600 малым.

Для большей точности лейкоциты считают по всей сетке в больших квадратах, не разделенных на малые квадраты и полосы, начиная с верхнего левого угла сетки. Для лучшего контрастирования затемняют поле зрения, опуская конденсор и закрывая диафрагму. Считают клетки, расположенные внутри квадрата и лежащие на любых двух линиях, чтобы дважды не подсчитывать одну и ту же клетку.

Расчет числа лейкоцитов проводят по формуле:

где X - число лейкоцитов в 1 мкл крови; а - число лейкоцитов в 100 больших квадратах; 20 - разведение крови; 100 - число больших квадратов; 250 - коэффициент пересчета на 1 мкл, так как объем одного большого квадрата равен 1/250 мкл (сторона квадрата - 1/5 мм, высота - 1/10 мм).

На практике для расчета количества лейкоцитов в 1 мкл крови их число в 100 больших квадратах умножают на 50, а в 1 л - полученную величину умножают на 106.

Примечание. При подсчете лейкоцитов неизбежна ошибка в 6–8 % случаев.

Причины ошибок.

При большом количестве нормоцитов в периферической крови их засчитывают в число лейкоцитов (и лейкоциты, и нормоциты - ядросодержащие клетки). Для того чтобы правильно установить количество лейкоцитов, из общего числа ядросодержащих клеток крови следует вычесть количество нормоцитов.
Остальные ошибки аналогичны тем, которые возникают при подсчете в счетной камере количества эритроцитов.

См. также:

Подсчет лейкоцитов в гематологическом анализаторе (автоматическом счетчике)

onlab.info

Определение количества лейкоцитов

Главная / Справочник по клинической лабораторной диагностике / Исследование крови / Лейкоциты / Определение количества лейкоцитов

Метод подсчета в камере

Расчет: в 100 больших квадратах (1600 малых) сосчитано а лейкоцитов. Помня, что объем малого квадрата равен 1/4000 мм3, а кровь разведена в 20 раз, рассчитывают количество лейкоцитов в 1 мкл крови: 4000*20 и делят на 1600 = а*1/2. Практически для получения действительного содержания лейкоцитов в 1 мкл крови достаточно полученное при подсчете число разделить пополам и приписать 2 нуля. В среднем ошибка метода составляет ± 7%.

www.medkurs.ru

Подсчет лейкоцитов и лейкоцитарной формулы.

Для подсчета лейкоцитов кровь разводят в смесителях, либо в пробирках. Для этой цели применяют 3-5% раствор уксусной кислоты (для разрушения эритроцитов), подкрашенный какой-либо анилиновой краской (для окраски ядер лейкоцитов). Счетную сетку заполняют так же, как для подсчета эритроцитов. Лейкоциты подсчитывают в 100 больших квадратах. В сетке Горяева удобно считать их в неразграфленных квадратах (их на сетке 100). Учитывая разведение крови и объем жидкости над квадратами, высчитывают постоянный множитель. При разведении в 20 раз он равен 50.

При работе с пробирками в них наливают предварительно 0,38 мл жидкости и выпускают в нее 0,02 мл крови. Для подсчета в пробирках автоматического счета эритроциты гемолизируют сапонином. Нормальное содержание лейкоцитов 4,3 109-11,3 109/л, или 4300-11 300 в 1 мкл крови.

Лейкоцитарную формулу подсчитывают в окрашенных мазках.

Хороший мазок отвечает следующим требованиям: он тонок, и форменные элементы лежат в нем в один слой; в этом случае мазок оказывается желтым и полупрозрачным. Хороший мазок равномерен, а клетки не повреждены при размазывании. Для того чтобы кровь легла ровным слоем на стекло, его обезжиривают прожиганием над пламенем газовой горелки или выдерживают в смеси спирта и эфира. Концом стекла прикасаются к свежевыпущенной маленькой капле крови и без промедления размазывают ее по стеклу. Перед окраской мазок фиксируют погружением в метанол на 3 мин, в этиловый спирт или его смесь с эфиром на 30 мин. Имеется и ряд других фиксаторов. Высохший после фиксации мазок заливают красителем.

Для различения клеток крови (определения лейкоцитарной формулы) прибегают к дифференциальной окраске. Наиболее широко применяется окраска по Романовскому -Гимзе. Этот краситель представляет собой смесь слабокислой (эозин) и слабощелочной (азур II) красок. Клетки и их части в зависимости от реакции среды в них воспринимают тот или иной компонент красителя: кислые (базофильные) субстанции окрашиваются азуром в голубой цвет, щелочные (оксифильные) окрашиваются эозином в красный цвет; нейтральные воспринимают обе краски и становятся фиолетовыми.

Лейкоцитарной формулой называют процентное соотношение отдельных форм лейкоцитов крови.

NB!Для достаточно точного ее вычисления необходимо просмотреть не менее 200 лейкоцитов.

Подсчет производят с иммерсионной системой. Ввиду того что клетки располагаются в мазке неравномерно (более крупные отходят к краям), важно придерживаться такого порядка передвижения по мазку, при котором в равной мере просматривались бы его края и середина. Применяется один из двух способов передвижения: по одному из них мазок передвигают от верхнего края до нижнего, отодвигают на 2 -3 поля зрения вдоль края, затем идут в обратном направлении до верхнего края и т. д. При втором способе от края продвигаются на 5-6 полей к середине мазка, затем столько же вбок, потом обратно к краю, отодвигаются на несколько полей вбок и опять повторяют передвижение, пока не будет сосчитано 50 клеток. Просматривают 4 таких участка по 4 углам мазка. Сосчитав 200 клеток, число делят пополам и определяют количество каждого вида лейкоцитов.

Лейкоциты являются элементами крови, быстро реагирующими на различные внешние воздействия и изменения внутри организма. Определение общего количества лейкоцитов может иметь большое диагностическое значение, так как выявляет состояние кроветворных органов или их реакцию на вредные воздействия. Увеличение числа лейкоцитов - лейкоцитоз - является результатом активизации лейкопоэза, уменьшение их числа - лейкопения - может зависеть от угнетения кроветворных органов, их истощения, повышенного распада лейкоцитов под действием антилейкоцитарных антител 1. Нейтрофилы. Наиболее изменчивой группой лейкоцитов являются нейтрофилы, число которых возрастает при многих инфекциях, интоксикациях и распаде тканей.

Характерным для активного нейтропоэза является не только увеличение общего числа нейтрофилов в крови, но и появление в ней незрелых форм: увеличивается число палочкоядерных, появляются юные нейтрофилы, иногда даже миелоциты. Такое «омоложение» состава нейтрофилов носит название сдвига лейкоцитарной формулы влево. Защитная роль нейтрофилов определяется их фагоцитарной функцией, бактерицидным действием и выделением протеолитических ферментов, способствующих рассасыванию некротизированных тканей и заживлению ран.

Наиболее часто регенераторный сдвиг появляется при наличии какого-либо воспалительного процесса или очага некроза. Очень резкий сдвиг влево до промиелоцитов и даже миелобластов при значительном лейкоцитозе носит название лейкемоидной реакции. Уменьшение числа нейтрофилов - абсолютная нейтропения - возникает при угнетающем костный мозг воздействии токсинов некоторых микроорганизмов (возбудители брюшного тифа, бруцеллеза и др.) и вирусов, ионизирующей радиации, ряда лекарственных препаратов.

2. Лимфоциты. Лимфоцитоз наблюдается в период выздоровления от острых инфекционных заболеваний, при инфекционном мононуклеозе, инфекционном лимфоцитозе, лимфолейкозе, краснухе, бруцеллезе, тиреотоксикозе.

Абсолютная лимфопения встречается при лучевой болезни, системных поражениях лимфатического аппарата: лимфогранулематозе, лимфосаркоме.

3. Эозинофилы. Находятся в крови в относительно небольшом количестве (содержатся преимущественно в тканях), но число их возрастает, иногда значительно, при аллергических процессах (сывороточная болезнь, бронхиальная астма), глистных инвазиях, зудящих дерматозах.

Уменьшение количества эозинофилов - эозинопения - вплоть до полного их исчезновения наблюдается при сепсисе, тяжелых формах туберкулеза, тифах, тяжелых интоксикациях.

4.Базофилы. Являются носителями важных медиаторов тканевого обмена (кровяные «эквиваленты» тучных тканевых клеток). При сенсибилизации организма число их увеличивается, при повторном введении аллергена резко уменьшается в результате их распада.

5.Моноциты. Увеличение числа моноцитов - моноцитоз - служит показателем развития иммунных процессов. Моноциты признаются аналогами тканевых макрофагов. Моноцит встречается при ряде хронических заболеваний (хрониосепсис, туберкулез, сифилис). Моноцитопения наблюдается иногда при тяжелых септических, гипертоксических формах брюшного тифа.

Агранулоциты. Отличительной особенностью агранулоцитов являются несегментированное ядро и базофильная (голубая) цитоплазма.

Лимфоцит - наименьший по размеру лейкоцит. Ядро круглое, овальное или бобовидное; занимает большую часть клетки, интенсивно окрашено. Цитоплазма большинства лимфоцитов узким ободком окружает ядро, окрашена в светло-синий цвет и просветляется к ядру.

Моноцит - самая крупная из кровяных клеток. Крупное ядро неправильной формы и относительно светлой окраски. Цитоплазма серовато-голубого, дымчатого цвета, не просветляется к ядру

Кроме перечисленных клеток, в нормальной крови редко, а при заболеваниях часто могут встретиться плазматические клетки. Они отличаются эксцентрически расположенным плотным ядром, часто колесовидной структуры. Число этих клеток увеличивается при некоторых инфекционных заболеваниях, раневом сепсисе, миеломной болезни.

При подсчете лейкоцитарной формулы обращают внимание не только на количественные сдвиги в ней, но и на качественные изменения форменных элементов. Ранее отмечались дегенеративные изменения лейкоцитов. При тяжелых интоксикациях зернистость нейтрофилов становится обильной, крупной, интенсивно окрашенной и носит название токсической (или токсогенной). Иногда в мазках крови обнаруживаются расплывчатые пятна, окрашенные подобно ядерному веществу лейкоцитов. Это так называемые тени Боткина-Гумпрехта - остатки ядерного хроматина, свидетельствующие о повышенной хрупкости лейкоцитов, приводящей к их распаду - лейкоцитолизу

99. Методика определения группы крови, понятие о резус-факторе.

1. Определение группы крови по стандартным сывороткам:

Необходимо следующее оснащение:

o два комплекта стандартных гемагглютинирующих сывороток I (0), II (А), III (В) групп двух различных серий и одна ампула сыворотки IV (АВ)

o флакон с изотоническим раствором хлорида натрия с пипеткой

o чисто вымытая сухая тарелка

o предметные стекла

o стерильные копьевидные иглы для прокола мякоти пальца

o стерильные марлевые шарики,

Стандартные сыворотки для определения группы крови по системе АВО выпускают с определенной цветовой маркировкой: I (0) - бесцветная, II (А) - голубая, III (В) - красная, IV (АВ) – желтая. Сыворотки хранят при температуре 4-10 °С. Сыворотка должна быть светлой и прозрачной. Наличие хлопьев, осадка, помутнение являются признаками непригодности сыворотки. Первые признаки агглютинации должны появляться не позднее чем через 30 с.

Тарелку делят цветным карандашом на 4 квадрата и в направлении по часовой стрелке обозначают квадраты I (0), II (А), III (В). В соответствующий квадрат тарелки пипеткой наносят крупную каплю сыворотки двух серий I (0), II (А), Ш (В) групп. Подушечку пальца обрабатывают спиртом и делают прокол кожи иглой. Первую каплю крови снимают марлевым шариком, последующие капли разными уголками предметного стекла вносят последовательно в капли сыворотки и тщательно размешивают. Капля вносимой крови должна быть в 5-10 раз меньше капли сыворотки. Затем путем покачивания тарелки тщательно перемешивают кровь с сывороткой. Предварительные результаты оценивают через 3 мин, после чего добавляют каплю изотонического раствора хлорида натрия, вновь смешивают путем покачивания тарелки и через 5 мин проводят окончательную оценку реакции агглютинации.

При положительной реакции изогемагглютинации хлопья и зернышки из склеившихся эритроцитов не расходятся при добавлении изотонического раствора хлорида натрия и перемешивании.

При отрицательной реакции капли сыворотки на тарелке прозрачные, равномерно розового цвета, не содержат хлопьев и зерен.

Возможны следующие 4 комбинации реакций агглютинации со стандартными сыворотками I (0), II (А), III (В) групп.

v Все 3 сыворотки в обеих сериях не дают агглютинации. Исследуемая кровь –

v Реакция изогемагглютинации отрицательная с сывороткой П (А) группы обеих серий и положительная с сыворотками I (0) и III (В) групп. Исследуемая кровь -

II (А) группы.

v Реакция изогемагглютинации отрицательная с сывороткой III (В) группы в обеих сериях и положительная с сывороткой I (0) и II (А) групп. Исследуемая кровь –

III (В) группы.

v Сыворотки I (0), II (А), III (В) групп дают положительную реакцию в обеих сериях. Кровь принадлежит к IV (АВ) группе. Но прежде чем дать такое заключение, необходимо провести реакцию изогемагглютинации со стандартной сывороткой IV (АВ) группы по той же методике. Отрицательная реакция изогемагглютинации позволяет окончательно отнести исследуемую кровь к IV (АВ) группе.

2. Понятие о резус-факторе.

В эритроцитах был обнаружен еще один антиген (агглютиноген), который назвали резус-фактором (Rh). Всех людей делят на лиц с резус-положительной (Rh+) и резус-отрицательной (Rh) кровью. Установлено, что у 85% людей в эритроцитах содержится резус-фактор, т. е. кровь у них является резус-положительной, а у 15% он не содержится, т. е. кровь у этих людей резус-отрицательная. К резус-фактору (резус-антигену) в норме в крови не имеется антирезус-агглютининов (готовых антител). Такие антитела появляются в сыворотке крови лишь в результате иммунизации человека с резус-отрицательной кровью резус-положительными эритроцитами. Подобная иммунизация наступает вследствие повторных переливаний резус-положительной крови резус-отрицательному реципиенту или при беременности женщины с резус-отрицательной кровью резус-положительным плодом. Иммунизированные таким образом люди становятся сенсибилизированными: при переливании им резус-положительной крови развивается тяжелое осложнение - гемотрансфузионный шок.

⇐ Предыдущая26272829303132333435Следующая ⇒

Необходимо для работы:

Проведение работы:

Цель работы:

Необходимо для работы:

Проведение работы:

не взбалтывать

· отсутствует гемолиз;

· частичный гемолиз;

· полный гемолиз.

Определение полей зрения.

Определение остроты зрения.

16. Дыхательные объемы и емкости. Методика определения ЖЕЛ. Спирография и спирометрия.

Применение миографии

· В психофизиологии для изучения возрастных закономерностей.

· В медицине для диагностики поражений периферической и центральной нервной системы.

· В физиологии труда и спорта.

· При изучении двигательной функции животных и человека.

· В исследованиях высшей нервной деятельности.

· В инженерной психологии (например, при исследовании утомления, выработки двигательного навыка).

· Для оценки при восстановлении нарушенной двигательной функции в ортопедии и протезировании.

Таблица 36

Затраты на основной обмен здоровых людей в зависимости от возраста и пола

Разница между показателями должного основного обмена, рассчитанными разными методами, обычно не превышает 10 %.

Термометрия.

Температура тела - важный показатель состояния здоровья человека. Нормальной температурой тела для взрослых в состоянии бодрствования и физиологического покоя (при измерении в подмышечной впадине) считается температура от 36°С до 36,9°С. Однако следует учитывать, что во время сна с 3 до 5 ч утра температура тела может достигать минимальных значений - 35,1–36,0°С. Таким образом, норма температуры тела при измерении в подмышечной впадине составляет 36±0,9°С (35,1 - 36,9°С). Температура 37°С и выше рассматривается как повышенная (гипертермия ), а 35°С и ниже – как пониженная (гипотермия ). При измерении в глубоких областях тела (прямой кишке, пищеводе) ее нормальные значения на 0,5°С выше, чем в подмышечной ямке.

Цель работы - определение минимального времени, необходимого для точного измерения аксиллярной температуры ртутными или электронными медицинскими термометрами в подмышечной впадине.

Материалы и оборудование: максимальный ртутный термометр, секундомер, 70 % спирт, вата.

Ход работы. Кожа подмышечной ямки должна быть сухой, так как при влажной коже термометр будет показывать более низкие значения температур из-за испарения влаги с поверхности ртутного резервуара. Обследуемый должен удерживать термометр в течение всего времени измерения, плотно прижав плечо к туловищу. Во время измерения температуры человек должен находиться в состоянии бодрствования и полного покоя.

Осмотрите медицинский термометр, убедитесь в его целости и протрите спиртом. Встряхните термометр до температуры 35°С. Поместите термометр в подмышечную впадину. Запишите показания термометра через 3, 5, 8, 10, 15 мин. Затем проведите термометрию с помощью электронного термометра, записывая показания шкалы прибора через 30 с, 1, 2, 3, 5, 8, 10, 15 мин. При выполнении работы необходимо следить, чтобы головка ртутного и кончик датчика электрического термометров удерживались по среднеаксиллярной линии.

По результатам опытов постройте графики показаний ртутного и электронного термометров в зависимости от времени измерения температуры.

Вывод: у испытуемого температура тела, измеренная в подмышечной впадине _____, длительность ее измерения ртутным должна быть не менее ___ мин.

21. Методика образования условных рефлексов.

Для образования условного рефлекса требуются определенные условия. Условным раздражителем, или сигналом, может быть любое изменение, возникшее во внешней среде или внутри организма. На каждый условный раздражитель (зажигание лампочки, музыкальные звуки, шумы, давление на поверхность кожи, прикосновение, чесание, укол, запах и т.п.) может быть выработан условный рефлекс.

Для образования условного рефлекса на условный (безразличный) раздражитель надо, чтобы этот условный сигнал предшествовал безусловному и в течение некоторого времени действия последнего сопровождал его. Например, звонок (условный сигнал) должен начать звенеть на 5–30 с раньше, чем собака получит корм (безусловный стимул), и некоторое время сопровождать еду. Для того, чтобы выработался условный рефлекс, надо несколько раз повторять такое сочетание.

Если сочетать условный раздражитель с пищевым подкреплением, то вскоре на этот, ранее безразличный раздражитель, образуется условный рефлекс. Один и тот же сигнал может стать раздражителем при выработке разных условных рефлексов. В одном случае звонок может вызвать слюноотделение, а в другом – оборонительный рефлекс и т.д. Это объясняется тем, что характер условного рефлекса определяется подкрепляющим безусловным рефлексом, т.е. условные рефлексы образуются на основе безусловных.

И.П. Павлов разработал методику образования условных рефлексов. Собаку помещают в специальную камеру, полностью изолированную от окружающего мира (никакие раздражители из внешней среды не должны проникать в камеру). Вне камеры находится и сам экспериментатор. При помощи специальной аппаратуры создаются разнообразные раздражители, выдается пищевое подкрепление, регистрируется слюноотделение и т.д. Вначале И.П. Павлов построил полностью изолированную камеру, однако позже выяснилось, что такая абсолютная изоляция не обязательна.

Таким образом, для образования условных рефлексов необходимы следующие специальные условия.

1. Наличие двух раздражителей: индифферентного (безразличного), который хотят сделать условным, и безусловного, вызывающего какую-либо деятельность организма, например отделение слюны, отдергивание лапы и т.п.

2. Индифферентный раздражитель (свет, звук и т.п.) должен предшествовать безусловному и некоторое время сопровождать действие последнего.

3. Безусловный раздражитель должен быть сильнее условного: для сытой собаки с низкой возбудимостью пищевого центра звонок не станет условным пищевым раздражителем.

4. Отсутствие отвлекающих посторонних раздражителей.

5. Активное состояние коры. Это верно и для человека. Если лекция не интересна и развивается полудремотное состояние, то материал не запоминается. Живая эмоциональная лекция с интересными примерами запоминается хорошо.

Электроэнцефалограмма (ЭЭГ) как метод регистрации электрических явлений в коре больших полушарий. Классификация ритмов ЭЭГ.

Электроэнцефалография (ЭЭГ) представляет собой метод регистрации биоэлектрической активности головного мозга, производимой через неповрежденные покровы головы.

Электрокортикография (ЭКоГ) - регистрация ведется с наложением электродов непосредственно на поверхность мозга. Введение электродов в глубокие отделы мозга позволяет провести электросубкортикографию (ЭСКоГ).

Краткая характеристика ЭЭГ здорового человека . В большинстве случаев у здорового бодрствующего человека, находящегося в положении лежа с закрытыми глазами или в темноте, регистрируются относительно регулярные, близкие к синусоидальным колебания биопотенциалов мозга, которые являются результатом множества электрических процессов в различных образованиях его, слагающихся в сложную волнообразную кривую, к которой условно применяют понятие о частоте, амплитуде, фазовых состояниях.

Особенно высокие и устойчивые кривые регистрируются в теменно-затылочной области, одиночные или групповые - в других отделах мозга. Эти кривые Н. Berger (1929) назвал альфа-ритмом; их напряжение при записи через электроды, расположенные на коже, колеблется в пределах 50-100 мкВ (в среднем 40 - 50 мкВ), продолжительность 60-140 мс и частота 8-13 колебаний в секунду. Редко они сохраняют устойчивость, амплитуда волн то убывает, го увеличивается, давая рисунок «веретен», «вздутий», «биений». Альфа-ритм преобладает на ЭЭГ здоровых взрослых людей в 70% случаев, у остальных выражен слабо или отсутствует (до 10% случаев). В передних отделах мозга, а также при подавлении альфа-активности внешними раздражениями выявляются бета-волны. Частота их в среднем равна 25 колебаниям в секунду и изменяется от 15 до 30 колебаний в секунду; волны большей частоты называются гамма-волнами.

Амплитуда бета-волн в 3-4 раза ниже, чем альфа-волн, и в некоторых записях эти колебания почти не различаются. Ткани, покрывающие мозг, оказывают большое электросопротивление (5*103-15*103 Ом) и снижают биопотенциалы в 5-10 раз, причем амплитуда быстрых колебаний уменьшается быстрее по сравнению с медленными волнами.

Основы классификации ритмов электроэнцефалограммы (ЭЭГ):

Традиционная ЭЭГ (диапазон частот 0,5-100 Гц):

Гамма-ритм (частота более 40 Гц, амплитуда менее 15 мкВ);

Бета-ритм (частота 14-40 Гц, амплитуда менее 25 мкВ);

Альфа-ритм (частота 8-13 Гц, амплитуда 10-150 мкВ);

Тета-ритм (частота 4-7 Гц, амплитуда 75-150 мкВ);

Дельта-ритм (частота 0,5-3 Гц, амплитуда свыше 100 мкВ).

Сверхмедленная биоэлектрическая активность

(диапазон частот менее 0,5Гц):

Секундные или дзета-волны (частота 0,1-0,5 Гц, период от 2 до 10 секунд, амплитуда менее десятки и сотни мкВ);

Многосекундные или тау-волны (частота 0,0167-0,1 Гц, период от 10 до 60 секунд, амплитуда сотни мкВ)

Минутные и многоминутные или эпсилон-волны (частота менее 0,0167 Гц, период от 1 минуты и более, амплитуда сотни мкВ, единицы и десятки мВ)

Относительно постоянный потенциал милливольтового диапазона или омега-потенциал (устойчив в течение часов, амплитуда ± 110 мВ)

Рецепторы, их классификация: по локализации (мембранные, ядерные), механизму развития процессов (ионо- и метаьотропные), по скорости приема сигнала (быстрые, медленные), по роду вопринимающих веществ.

Рецепторы представляют собой конечные специализированные образования, предназначенные для трансформации энергии различных видов раздражителей в специфическую активность нервной системы.

Классификация:

по локализации

· мембранные

· ядерные

по механизму развития процессов

· ионотропные (представляют собой мембранные каналы, открываемые или закрываемые при связывании с лигандом. Возникающие при этом ионные токи вызывают изменения трансмембранной разности потенциалов и, вследствие этого, возбудимости клетки, а также меняют внутриклеточные концентрации ионов, что может вторично приводитъ к активации систем внутриклеточных посредников. Одним из наиболее полно изученных ионотропных рецепторов является н-холинорецептор.)

· метаботропные (связаны с системами внутриклеточных посредников. Изменения их конформации при связывании с лигандом приводит к запуску каскада биохимических реакций, и, в конечном счете, изменению функционального состояния клетки.)

по скорости приема сигнала

· быстрые

· медленные

по роду вопринимающих веществ

· Хеморецепторы - воспринимают воздействие растворенных или летучих химических веществ.

· Осморецепторы - воспринимают изменения осмотической концентрации жидкости (как правило, внутренней среды).

· Механорецепторы - воспринимают механические стимулы (прикосновение, давление, растяжение, колебания воды или воздуха и т. п.)

· Фоторецепторы - воспринимают видимый и ультрафиолетовый свет

· Терморецепторы - воспринимают понижение (холодовые) или повышение (тепловые) температуры

· Барорецепторы – воспринимают изменение давления

3. Ионотропные рецепторы, метаботпропные рецепторы и их разновидности. Системы вторичных посредников действия метаботропных рецепторов (цАМФ, цГМФ, инозитол-3-фосфат, диацилглицерол, ионы Са++).

На постсинаптической мембране выделяют два типа рецепторов - ионотропные и метаботропные.

Ионотропнный
В случае ионотропного рецептора чувствительная молекула содержит не только активный центр для связывания медиатора, но также ионный канал. Воздействие «первичного посредника» (медиатора) на рецептор приводит к быстрому открыванию канала и развитию постсинаптического потенциала.
Метаботропный
При присоединении медиатора, и возбуждении метаботропного рецептора изменяется внутриклеточный метаболизм, т.е. течение биохимических реакций

С внутренней стороны мембраны к такому рецептору присоединен целый ряд других белков, выполняющих ферментативные и частью передающие («посреднические») функции (рис.). Белки-посредники относятся к G-белкам. Под влиянием возбужденного рецептора G-белок воздействует на белок-фермент, обычно переводя его в «рабочее» состояние. В результате запускается химическая реакция: молекула-предшественник превращается в сигнальную молекулу - вторичный посредник.

Рис. Схема строения и функционирования метаботропного рецептора: 1 - медиатор; 2 - рецептор; 3 - ионный канал; 4 - вторичный посредник; 5 - фермент; 6 - G-белок; → - направление передачи сигнала

Вторичные посредники - это мелкие, способные к быстрому перемещению молекулы или ионы, передающие сигнал внутри клетки. Этим они отличаются от «первичных посредников» - медиаторов и гормонов, передающих информацию от клетки к клетке.

Наиболее известным вторичным посредником является цАМФ (циклическая аденозинмонофосфорная кислота), образуемая из АТФ с помощью фермента аденилатциклазы. Похожа на него цГМФ (гуанозинмонофосфорная кислота). Другими важнейшими вторичными посредниками являются инозитолтрифосфат и диацилглицерол, образуемые из компонентов клеточной мембраны под действием фермента фосфолипазы С. Чрезвычайно велика роль Ca 2+ , входящего в клетку снаружи через ионные каналы или высвобождающегося из особых мест хранения внутри клетки («депо» кальция). В последнее время много внимания уделяется вторичному посреднику NO (оксиду азота), который способен передавать сигнал не только внутри клетки, но и между клетками, легко преодолевая мембрану, в том числе от постсинаптического нейрона к пресинаптическому.

Заключительный шаг в проведении химического сигнала - воздействие вторичного посредника на хемочувствительный ионный канал. Это воздействие протекает либо непосредственно, либо через дополнительные промежуточные звенья (ферменты). В любом случае происходит открытие ионного канала и развитие ВПСП либо ТПСП. Продолжительность и амплитуда их первой фазы будет определяться количеством вторичного посредника, которое зависит от количества выделившегося медиатора и длительности его взаимодействия с рецептором.

Таким образом, механизм передачи нервного стимула, используемый метаботропными рецепторами, включает в себя несколько последовательных этапов. На каждом из них возможна регуляция (ослабление либо усиление) сигнала, что делает реакцию постсинаптической клетки более гибкой и адаптированной к текущим условиям. Вместе с тем это же приводит к замедлению процесса передачи информации

Система цАМФ

Фосфолипаза С

Методика подсчета лейкоцитов в крови.

4. Методика определения количества гемоглобина в крови.

5.
Определение цветного показателя крови. Абсолютное содержание гемоглобина в эритроцитах.

6. Методика определения скорости оседания эритроцитов (СОЭ).

7. Методика определения групп крови.

Определения свертывания крови по Сухареву.

Необходимо для работы: испытуемый, чистый и сухой капилляр от прибора Панченкова, стерильный скарификатор и пинцет, спирт, йод, вата.

Проведение работы:

1. Проколоть палец, снять первую каплю крови сухой ваткой.

2. Погрузить конец капилляра в каплю крови, не прижимая отверстия к пальцу.

3. Слегка опустив наружный конец капилляра, набрать 20-30 мм крови и перевести этот столбик крови на середину.

4. Держа капилляр двумя пальцами, произвести плавное покачивание его в обе стороны с амплитудой 40-45 0 .

Свободное смещение столбика крови говорит о том, что свертывание еще не наступило. Замедленное движение крови при наклоне капилляра характеризует начало свертывания, при этом на внутренней стенке капилляра появляются небольшие сгустки.

Момент полной остановки движения столбика крови в капилляре соответствует наступлению окончательного свертывания крови. По предлагаемой методике скорость свертывания крови в норме: начало свертывания происходи через 30 с - 2 мин., полное свертывание - через 3-5 мин.

9. Методика определения осмотической резистентности эритроцитов.

Цель работы: ознакомиться со свойствами осмотической устойчивости эритроцитов и произвести количественную оценку их резистентности по отношению к гипотоническим растворам.

Необходимо для работы: восемь чистых и сухих пробирок, штатив, мерный цилиндр на 5-10 мл, 1%-ный раствор хлористого натрия, дистиллированная вода, стерильные скарификаторы и пинцет, спирт, йод, вата, стеклянные палочки, мерные пипетки.

Проведение работы:

1. В каждую из пробирок налить 1%-ный раствор хлористого натрия в убывающем количестве от 0,6 до 0,15 мл, затем в каждую пробирку добавить дистиллированной воды до 1 мл. Пробирки пронумеровать.

2. Во все пробирки добавить с помощью капилляра Сали по капле крови. Добавление крови лучше начинать с пробирки, в которую помещен раствор с наименьшей концентрацией, и идти в сторону увеличения. Осторожно перемешать содержимое, чтобы не образовались пузырьки воздуха.

3. Оставить пробирки в штативе на хорошо освещенном месте на 30-40 мин, после чего рассмотреть их содержимое (не взбалтывать !). Проанализировать результаты.

4. О границах (уровне) осмотической резистентности эритроцитов судить по степени гемолиза крови в различных гипотонических растворах.

6. Отметить пробирки, в которых:

· отсутствует гемолиз;

· частичный гемолиз;

· полный гемолиз.

7. В выводах дать определение верхней и нижней границ резистентности эритроцитов и сделать заключение о соответствии полученных результатов физиологической норме.

Устройство камеры и сетки Горяева . Камера Горяева представляет собой толстое предметное стекло, прорезанное четырьмя поперечными бороздами. Борозды делят стекло на пластинки - две боковые и среднюю. Средняя пластинка на 0,1 мм ниже боковых. Она разделена поперечной бороздкой на 2 равные части. На каждой половине средней пластинки нанесена сетка Горяева. Принадлежностью" камеры служит шлифованное покровное стекло. Его следует наложить так, чтобы оно покрыло обе боковые и среднюю пластинки. Нажимая большими пальцами на края стекла, его притирают к боковым пластинкам до появления радужных колец (кольца Ньютона).

Так как боковые пластинки выше средней, между нею и покровным стеклом остается щель. Это и есть камера, в которую заливают разведенную кровь. Глубина камеры 0,1 мм.

Нанесенная на дно камеры сетка Горяева квадратная. Сторона ее - 3 мм, площадь--9 мм » . Сетка разграфлена на 225 больших квадратов-15 по горизонтали и 15 по вертикали. Часть больших квадратов (через два на третий) разделена на 16 малых квадратов. Сторона малого квадрата равна 1/20 мм.

Техника подсчета . Правильное заполнение счетной камеры разведенной кровью обеспечивает точность подсчета форменных элементов. Перед заполнением камеры содержимое пробирки перемешивают, вращая ее между ладонями в течение 2 мин. Разведенную кровь наносят на среднюю пластинку камеры пастеровской пипеткой с баллоном или стеклянной палочкой, помещая ее около края покровного стекла. По закону капиллярности жидкость затекает под стекло, заполняя камеру.

После заполнения камеру нужно положить на стол на 2-3 мин, пока движение жидкости в ней не прекратится, и клетки не расположатся неподвижно на фоне квадратов сетки. При заполнении камеры жидкость не должна стекать в борозды. Недопустимо попадание в камеру пузырьков воздуха.

Подсчет производят под малым" увеличением микроскопа (об.8, ок.10 или 15), конденсор должен быть опущен, а диафрагма закрыта.

Возможные ошибки при подсчете:

Правила :

К данному квадрату принадлежат клетки, находящиеся большей своей половиной внутри него;

Клетки, разделенные пограничной линией пополам, считают только на верхней и левой границе квадрата;

Клетки же, лежащие большей своей половиной вне данного квадрата не считают вовсе.

Принцип . Подсчет эритроцитов под микроскопом в определенном количестве квадратов счетной сетки и пересчет на 1 мкл крови, исходя из объема квадратов и разведения крови.

Реактивы . 0,9 % раствор хлорида натрия

Специальное оборудование . 1. Счетная камера Горяева. 2. Микроскоп.

Ход исследования . Разводят исследуемую кровь в 200 раз. Для этого в сухую пробирку отмеривают 4 мл реактива 1 или 2. Пипеткой набирают 0,02 мл крови. Кончик пипетки вытирают фильтровальной бумагой или марлей, и кровь выдувают на дно пробирки; пипетку тщательно промывают в верхнем слое жидкости, повторно набирая ее и выдувая в пробирку, содержимое пробирки перемешивают и оставляют стоять до момента счета (рекомендуется считать эритроциты в ближайшие 2-3 ч после взятия крови, а при гемолитических и. В 12-дефицитных анемиях - сразу после взятия, так как эритроциты могут разрушиться). Недопустимо оставлять взятую кровь с несосчитанными эритроцитами на следующий день, так как эритроциты частично разрушаются.

Подготавливают счетную камеру : протирают насухо камеру с сеткой и покровное стекло, затем покровное стекло притирают к камере, слегка надавливая на стекло таким образом, чтобы по краям его появились радужные полосы (это свидетельствует о требуемой высоте камеры - 0,1 мм).

Заполняют счетную камеру разведенной кровью : предварительно несколько раз тщательно встряхивают содержимое пробирки, затем пастеровской пипеткой или стеклянной палочкой отбирают каплю разведенной крови и подносят ее к краю покровного стекла, следя за тем, чтобы она равномерно без пузырьков воздуха заполнила всю поверхность камеры с сеткой, не затекая в бороздки. Заполненную камеру оставляют в горизонтальном положении 1 мин (ДЛЯ ОСЕДАНИЯ эритроцитов).

Для подсчета эритроцитов - микроскоп (объектив на 8х, окуляр на 10Х), находят верхний левый край сетки. Счет производят в 5 больших квадратах, разделенных на 16 малых, т. е. в 80 малых квадратах.

Расчет количества эритроцитов:

производится по следующей формуле:

Х= а ■ 4000 ■ в

где X - количество форменных элементов в 1 мкл крови;

а - количество форменных элементов, сосчитанных в 80 малых квадратов;

б- количество сосчитанных малых квадратов;

в - степень разведения крови; 1\4000 мкл - объем малого квадрата; умножая на 4000, приводим к объему 1 мкл крови.

Сокращенная формула: Х= а х10000

Нормативные показатели:

У мужчин: 4,0-5,0 х 10 12

У женщин: 3,7-4,7 х 10 12

Клинико-диагностическое значение: Снижение числа эритроцитов в крови является одним из основных лабораторных критериев анемии. Однако степень эритроцитопении широко варьирует при разных формах малокровия. Так, при наиболее распространенном заболевании - железодефицитной анемии на почве хронических кровопотерь - количество эритроцитов может быть нормальным или нерезко сниженным (3 10 6 - 3,6-10 6 в 1 мкл, или 3-10" 2 /л - 3,6-10 |2 /л). При острой кровопотере, В|2 -дефицитной анемии (в стадии рецидива), гипопластической анемии, гемолитических анемиях (в период криза) число эритроцитов в крови может значительно снизиться и достигнуть I -10 6 в 1 мкл, или 1 10 |2 /л и менее.

Повышение количества эритроцитов в крови - эритроцитоз - может быть обусловлен многими причинами. Значительный эритроцитоз (6,5-10 6 -8,5-10 е в 1 мкл, или 6,5-10 |2 /л - 8,5-10 |2 /л крови) является одним из важных лабораторных симптомов эритремии. Другие гемобластозы миелопролиферативной природы (сублейкемический миелоз или миелофиброз и хронический миелолейкоз) реже сопровождаются эритроцитозом и только в начальной стадии заболевания.

Вторичный (симптоматический) эритроцитоз может сопутствовать широкому кругу различных заболеваний и бывает абсолютным (связанный с усилением нормального эритропоэза) и относительным (гемоконцентрационный). Абсолютные эритроцитозы сопутствуют хроническим обструктивным заболеваниям легких, врожденным порокам сердца, первичной легочной гипертензии, синдрому Пиквика, наследственным гемоглобинопатиям, гипернефроидному раку, гемангиобластоме мозжечка, гепатоме, гормонально-активным опухолям, заболеваниям, сопровождающимся стенозом почечных артерий, заболеваниям ЦНС и др. Вторичные относительные эритроцитозы связаны с нарушением гемо-концентрации и характеризуются нормальным объемом циркулирующих эритроцитов при снижении массы циркулирующей крови и массы циркулирующей плазме.

Патологические формы эритроцитов

Повышение числа эритроцитов - полицитемия, может быть истинной (опухолево-пролиферативный процесс) и симптоматической (реактивное раздражение эритропоэза, сгущение крови, нарушение нервной регуляции и перераспределения). Понижение числа эритроцитов - анемия (постгеморрагическая, гемолитическая, вследствие нарушения кроветворения).

Качественные изменения эритроцитов . Анизоцитоз - изменение величины эритроцитов (эритроциты меньших размеров называются микроцитами; больших - макроцитами, эритроциты диаметром 12 мкм и более называются мегалоцитами). Пойкилоцитоз - изменение формы эритроцитов (грушевидные, серповидные - дрепаноциты, каплевидные, мишеневидные, с вытянутыми концами, шизоциты - обломки разрушенных эритроцитов, акантоциты - эритроциты зубчатой формы, стоматоциты - эритроциты с просветлением в центре в виде узкой линейной полоски как форма рта, эхиноциты - эритроциты с множественными выростами, анулоциты - эритроциты в виде пустых колец). Анизохромия - изменение интенсивности окраски эритроцитов в патологических случаях. Встречаются бледно окрашенные эритроциты - гипохромия, интенсивно окрашенные - гиперхромия. Эритроциты могут окрашиваться не только кислыми, но и основными красителями - полихромазия.

Обнаруживаются при патологии в периферической крови ядросодержащие эритроциты: нормобласты, эритробласты и мегалобласты. Мегалоциты и мегалобласты характерны для анемии Аддисона-Бирмера.

В эритроцитах можно иногда обнаружить остатки ядерной оболочки - так называемые кольца Кебота и ядерные остатки - тельца Жолли при мегалобластных анемиях, отравлении гемолитическими ядами и др. При свинцовом отравлении и у людей, принимающих препараты крови, наблюдается базофильная пунктуация эритроцитов (наличие точечной зернистости). Сидероциты - эритроциты с включениями не гемоглобинового железа (ферритин, гемосидерин) в виде мелких гранул синего цвета.

2.5 Подсчет лейкоцитов

Вам могут быть интересны следующие материалы

Аркан Королева пентаклей: Значение и описание

К чему снится женская грудь

Консультация

Дерматология

Гинекология

Маммология

Косметология

Дерматокосметология